Co je čtečka mikrotitračních destiček ELISA?
Čtečka mikrotitračních destiček, tedy enzymatický imunosorbentní test, je speciální přístroj pro enzymatický imunosorbentní test. Ve skutečnosti je to speciální fotoelektrický kolorimetr nebo spektrofotometr v přestrojení a jeho základní pracovní princip je v podstatě stejný jako hlavní struktura a fotoelektrický kolorimetr. Zjednodušeně se dají rozdělit do dvou kategorií, poloautomatické a plně automatické, ale princip jejich práce je v zásadě stejný. Jeho jádrem je kolorimetr, to znamená, že kolorimetrická metoda se používá k analýze obsahu antigenu nebo protilátky. Stanovení ELISA obecně vyžaduje, aby konečný objem testovacího roztoku byl menší než 250 μl, a test nelze dokončit obecným fotoelektrickým kolorimetrem, takže na fotoelektrický kolorimetr ve čtečce mikrodestiček jsou kladeny zvláštní požadavky.
Zásada
Čtečka mikrodestiček je vlastně speciální fotoelektrický kolorimetr nebo maskovaný spektrofotometr a jeho základní pracovní princip je v podstatě stejný jako hlavní struktura a fotoelektrický kolorimetr. Obrázek ukazuje práci jednokanálové automatické čtečky vzorkovacích mikrodestiček. Schematický diagram. Světelná vlna emitovaná lampou světelného zdroje je filtrem nebo monochromátorem transformována na monochromatické světlo a vstupuje do testovaného vzorku v plastovém mikroporézním sloupu. Část monochromatického světla je absorbována vzorkem a druhá část je přenášena skrz vzorek Osvětlený fotodetektor převádí různé světelné signály testovaného vzorku na odpovídající elektrické signály. Elektrické signály jsou zpracovávány předzesilováním, logaritmickým zesílením a analogově-digitální konverzí. Vstupte do mikroprocesoru pro zpracování a výpočet dat a nakonec zobrazte výsledky na displeji a tiskárně. Mikroprocesor také řídí pohyb mechanického hnacího mechanismu ve směru X a Y, aby se mikrodestička pohybovala řídicím obvodem, aby se realizoval proces automatické detekce vzorkování. Jiné čtečky mikrodestiček využívají k detekci ruční pohyb mikrodestičky, odpadá tedy mechanický pohon a ovládací obvod ve směru X a Y, takže přístroj je menší a konstrukce jednodušší.
Mikrotitrační destička je průhledná plastová destička speciálně používaná k umístění vzorku, který má být testován. Destička má několik řad malých otvorů jednotné velikosti a odpovídající antigen nebo protilátka je zapuštěna v otvoru. Každý malý otvor pojme několik deseti mililitrů roztoku.
Světlo je elektromagnetické vlnění. Vlnová délka 100nm-400nm se nazývá ultrafialové světlo, světlo mezi 400nm a 780nm lze pozorovat lidským okem a vlnová délka větší než 780nm se nazývá infračervené světlo. Lidé vidí barvy pouze proto, že světlo dopadá na objekt a odráží se od objektu zpět. Zelené rostliny jsou zelené, protože většina rostlin absorbuje červeno-oranžové světlo a modrofialové světlo, ale neabsorbují a neodrážejí zelenou, takže rostliny vypadají zeleně. Principem měření čtečky mikrodestiček je detekce absorbance analytu při specifické vlnové délce.
Struktura
Existují 40jamkové destičky, 55jamkové destičky, 96jamkové destičky a tak dále. Různé přístroje používají různé clony, které lze testovat jednu po druhé nebo řadu po řadě.
Monochromatické světlo používané čtečkou mikrodestiček lze získat buď přes koherentní filtr nebo stejný monochromátor jako spektrofotometr. Při použití filtru jako filtračního zařízení je to stejné jako u běžného kolorimetru. Může být umístěn před mikrodestičkou nebo za mikrodestičkou. Za kondenzátorem se membrána dostane k reflektoru, odráží se reflektorem pod úhlem 90° a prochází kolorimetrickým roztokem vertikálně a poté prochází filtrem. K fotobuňce.
Z pracovního blokového diagramu a diagramu světelné dráhy čtečky mikrodestiček je vidět, že má následující rozdíly od běžných fotoelektrických kolorimetrů:
(L) Nádoba na testovaný kolorimetrický roztok již nepoužívá kyvetu, ale plastovou mikrodestičku. Mikrodestička je obvykle vyrobena z průhledného polyetylenového materiálu, který má silný adsorpční účinek na antigen a protilátku, proto se používá Působí jako nosič pevné fáze.
⑵Vzhledem k tomu, že plastová mikrodestička obsahující vzorek je víceřadá porézní, světlo může procházet pouze vertikálně, takže světelný paprsek čtečky mikrodestiček prochází testovaným roztokem a mikrodestičkou vertikálně. Světelný paprsek může být shora dolů nebo může procházet kolorimetrickou tekutinou zdola nahoru.
⑶ Čtečky mikrodestiček obvykle nejen používají A, ale někdy také používají optickou hustotu OD k vyjádření absorbance. Čtečky mikrodestiček lze rozdělit do dvou typů: jednokanálové a vícekanálové a jednokanálové se dělí na dva typy: automatické a manuální. Automatický typ přístroje K dispozici je mechanický pohonný mechanismus ve směru X a Y, který dokáže posílat malé otvory mikrodestičky L jeden po druhém pod paprsek k testování, a ruční typ využívá k měření ruční pohyb mikrodestičky.
Na základě jednokanálové čtečky mikrodestiček byla vyvinuta vícekanálová čtečka mikrodestiček. Tento typ čtečky mikrodestiček je obecně automatizovaný. Nemá více paprsků a více fotodetektorů, jako je 12kanálový přístroj s 12 paprsky nebo 12 světelnými zdroji, 12 detektory a 12 zesilovači, působením mechanického pohonného zařízení ve směru X je detekováno 12 vzorků v řádek. Rychlost detekce vícekanálové čtečky mikrodestiček je vysoká, ale její struktura Složitější ceny jsou také vyšší.
Rozsah použití čtečky mikrodestiček
Hematologický test Test na protilátky související s krevními destičkami PAIgA, PAIgG, PAIgM
Stanovení D-dimeru D-dimer
Stanovení produktů degradace fibrinu v séru FDP
Stanovení T3, T4 trijodthyroninem a tetrajodthyroninem
Imunologický test Stanovení C-reaktivního proteinu CRP
Stanovení imunoglobulinů IgD, IgE
Stanovení cirkulujících imunokomplexů CIC
Stanovení revmatoidního faktoru IgG, IgA, IgM RF
Protilátka proti tyreoglobulinu, stanovení mikrozomálních protilátek TG, TM
Imunologická detekce rakoviny nádoru Stanovení alfa-fetoproteinu AFP
Stanovení karcinoembryonálního antigenu CEA
Stanovení prostatického specifického antigenu PSA
Stanovení karcinomu pankreatu, karcinomu žlučových cest, karcinomu žaludku CA19-9
Stanovení rakoviny vaječníků CA125
Stanovení karcinomu prsu CA15-3
Stanovení cervikálního spinocelulárního karcinomu SCC
Detekce mnohočetné rakoviny kostní dřeně
Stanovení hTG rakoviny štítné žlázy
Imunologický test na infekční onemocnění, sérologický test na hepatitidu A, anti-HAV-IgM
Sérologický test na hepatitidu B Dva a půl páru
Sérologická detekce hepatitidy C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Sérologický průkaz hepatitidy D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Sérologický průkaz hepatitidy E Anti-HEV-IgG
Detekce protilátek proti hemoragické horečce s renálním syndromem HFRS-IgG
Detekce protilátky IgM proti viru japonské encefalitidy
Detekce protilátek proti viru lidské imunodeficience (tj. regionální AIDS) HIV β 2 M
Funkční test prenatální a postnatální péče Test na virus Toxoplasma TOXO
Detekce viru zarděnek RV
Detekce cytomegaloviru CMV
Detekce viru herpes simplex Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
Jiní mohou také provádět genetické testování a položky kontroly reziduí zvířat, reziduí pesticidů atd.
